À l’âge de dix ans, Thibault Truffert effectue sa première expérience professionnelle comme comédien dans le long métrage Promenons-nous dans les Bois de Lionel Delplanque.
Huit ans plus tard, il suit en parallèle des études d'ingénieur à l'ISEP et de théâtre au cours Éva Saint-Paul. Son diplôme en poche, il se lance dans une double carrière de développeur informatique freelance et d'acteur. On le voit notamment en rôle principal dans Huis Clos de Jean-Paul Sartre mis en scène par Joyce Franrenet de 2012 à 2014, dans le Petit Oiseau Blanc de James Matthew Barrie ainsi que dans Solaris de Stanislas Lem, mis en scène par Rémi Prin. Il interprète également le rôle de Higgins dans une adaptation de My Fair Lady en 2017. Enfin, il incarne l'Abbé Faria dans Les Prisonniers du Château d'If, d'après Alexandre Dumas, mis en scène par Gabriel Laborde, rôle pour lequel il gagne deux prix d’interprétation.
Depuis 2022, il joue dans le Cercle des Illusionnistes ainsi que dans Edmond d’Alexis Michalik.   
En 2023, il reprend la co-direction du Bouffon Théâtre avec Marc Poublan et Ophélie Audon.